د پروټین انجنیری لپاره وسایل

د پولیمیریز سلسله غبرګون

02 د بندیز انزیمونه

د انزیمونو موندنه چې د محدودیت پای ته رسیږي د پروټین انجنیري لپاره اړین دي. دا انزايمونه په ځانګړو ځايونو کې د اين ايي ډي اينټ کول د نيکلايټايډ د ترتيب پر بنسټ دي. په سلګونه بیلابیل بندیز انزیمونه ، په یو ځانګړي ځای کې د DNA د مینځلو توان لري، د بیټرایریا د ډیری بیلابیلو بیلتونونو څخه جلا شوي. د بندیز انزیم سره د DNA کټیټ ډیری کوچنۍ ټوټې، د مختلفو اندازو تولیدوي. دا کیدای شي د جیل الیکٹروفوریزس یا کروماتګرافی کارول شي.

03 Electrophoresis

د حجرو کلتور څخه د DNA پاکول، یا دا د بندیز انزیمونو کارولو څخه کارول به د ډیرو کارونو څخه نه وي که موږ د DNA لیدنه ونکړو - دا د دې لپاره پیدا کول پیدا کوي چې ستاسو په ارټ کې څه شی موجود وي یا نه دې ته ننوتل. د دې کار کولو لپاره یوه لاره د جیل الیکٹروفوریسس لخوا ده. ګیلونه د مختلفو موخو لپاره کارول کیږي، د DNA د انټرنټونو او نښو لپاره د DNA کتل کولو څخه لیدل کیږي.

04 د DNA دوه ټوټې شاملې کړئ

په جینیاتي څیړنو کې، دا اړینه ده چې د DNA دوه یا ډیرو انفرادي ډولونو سره اړیکه ونیسي، د بیا میشتیدونکي ډنډ جوړول، یا د سرکلر ډنډ بندول چې د محدود انزیمونو سره پرې شوي. انزايمونه چې د DNA لايزونو په نوم ياديږي کولاى شي د نيکليوټايډ زنجنو تر منځ د واوروګل بانډونه رامنځته کړي. د انزیمز ډي این این پالیمیریز I او پولینکولوډایډ کمیسس په دې پروسه کې هم مهم دي، د تشې ډکولو یا په ترتیب سره د 5 پایونو فاسفوریټلنګ لپاره.

05 د کوچنیو ځان وژونکو DNA انتخاب

د DNA کوچنۍ سرې ټوټې چې د باکتیریا جینوم برخه نه وي، مګر د ځان په نقل کولو وړتیا لري، د پلازمین په توګه پیژندل کیږي. Plasmids اکثرا د مایکروګانیزمونو ترمنځ جینونو د لیږد لپاره د ویکټورانو په توګه کارول کیږي. په بایو ټیکنالوژیو کې، کله چې د ګیټ جین پرانستل شو او دواړه جین او پلاسمید د محدود انزیمونو پواسطه پرې کیږي، دوی د یوځای کیدونکي DNA په نوم پیژندل شوي سره یو ځای لیږدول کیږي. ویروس (بکتریروفراج) DNA کیدای شی د ویټور په توګه وکارول شی، لکه څنګه چې کیدای شی، بیا میټینټس لرونکي پلاسمیډونه چې د باکتریافجج جینس لري.

06 د ویټور د حرکت کولو تګلاره په میزبان سیل کې

په ویټور باندې د جینیاتي موادو لیږلو پروسه د پلاسمید په څیر، د کوربه نوي حجرو کې، بدلون بدل کیږي. دا تخنیک ته اړتیا لري چې د کوربه حجرو د چاپیریال بدلون سره مخ کیږي چې دوی دوی "وړتیا" یا د ویټور لپاره په عادي توګه د پاتي وړ کوي. برقی برښنا یو ډول تخنیک دی. لوی پلاسمید، ټیټ موثریت چې له هغې سره د حجرو لخوا اخیستل کیږي. د ډی ډي ډي ډی برخې په اسانۍ سره د بکتریروفراج، ریورورویرس یا نورو ویروس ویکټرونو یا کاسمینډونو څخه کار اخیستل کیږي چې د لیږدولو په طریقه کې کارول کیږي. Phage یا Viral vectors معمولا په دوامداره درملو کې کارول کیږي مګر کیدی شي زموږ د کروموزوم په برخو کې د DNA د ننوتلو سبب شي چیرته چې موږ دا نه غواړو، پیچلتیاوې او حتی سرطان هم پیدا کوي.

07 د ترانسپورتیک ارګانیزم غوره کولو طریقه

ټولې حجرې به د بدلون په وخت کې د DNA لیږد ونلري. دا اړینه ده چې د هغو کسانو د موندلو یوه میتود وي چې ترسره کوي. په عمومي توګه، پلاسمس د انټي بیوټیک مقاومت لپاره جینونه لیږدوي او ټرانسجنیک حجرې د دغو جینونو د بیان او د رسنیو د ودې توان لري چې د انټي بیوټوټ په ګډون وده کوي. د انتخاب بدیل طریقه د نورو رپورټ پروټینونو لکه X-gal / LacZ سیسټم، او یا د شنه فلوروسیسنس پروټین پورې تړاو لري، چې په ترتیب سره د رنګ او فلوروریسنس پر اساس انتخاب انتخابوي.