په 3 آسانه مرحلو کې د TBE بفر څنګه کول

دا بفر د DNA د الیکروفروریزس جلا کولو لپاره کارول کیږي

TBE بفر د ټیس بیس، بورک اسید او EDTA (یا په بشپړه توګه Tris-Borate-EDTA) څخه جوړ شوی بفر حل دی. دا بفر ډیری وختونه د DNA محصولاتو تحلیل کې د Agarose gel electrophoresis لپاره کارول کیږي چې د PCR پرله پسې کولو، د DNA پاکولو پروتوکولونو یا د DNA کلونوني تجربو څخه.

TBE بفر په ځانګړې توګه د وړو DNA ټوټو (MW <1000) جلا کولو لپاره ګټور دی، لکه د بندیز انزیم ډیزاین کوچني محصولات.

TBE د لوړې کولو ظرفیت لري او د TAE بیه په پرتله خورا نرم حل ورکوي. د اماراتو ټایډر د ټیز بیس، اییکټ اسډ او EDTA (Tris-Acetate-EDTA) جوړ شوی حل دی.

TBE عموما د TAE په پرتله خورا ګران کیږي او د DNA لیګیز منع کوي، کوم چې ممکن د DNA پاکولو او خنډونو مرحلو په پام کې نیولو سره ستونزې پیدا کړي. د درې ساده ګامونو سره چې تعقیب شوي، د TBE بفر جوړولو څرنګوالی زده کړئ. دا باید د دې بفر جوړولو لپاره شاوخوا 30 دقیقو وخت ونیسي. دلته څنګه دي:

د EDTA د سټیل حل چمتو کول

د EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) حل باید د وخت څخه وړاندې چمتو شي. EDTA بھ پھ بشپړه توګھ پھ حل کې لاړ نشي تر څو پورې چې pH پھ شاوخوا 8.0 کې سمون ومومي. د 500 ملیونه ذخیرې حل لپاره د 0.5 M EDTA حل، د EDTA د ویډیمیم مالګې 93.05 ګرام وزن) FW = 372.2 (. بیا یې دا په 400 کیلو مترو منحل شوي اوبو کې منحل کړئ او pH د NaOH سره سمون ورکړئ. له هغې وروسته، د 500 ملروټرونو وروستی حجم ته د حل لاره غوره کړه.

د TBE د سټیل حل چمتو کول

د TBE زیرمه حل کړئ (54 G Tris base) FW = 121.14 (او 27.5 ګ بورک اسید) FW = 61.83 (او د منیز شوي اوبو شاوخوا نږدې 900 ملیونه په مینځ کې ټوټه کړئ. بیا د 0.5 M EDTA (pH 8.0) 20 ملروټرونه اضافه کړئ او حل د حل کولو یو لیټ د 1 لیټ پای ته ورسوئ.

دا حل د کوټې په درجه کې ذخیره کیدی شي مګر یو پخوانی به په پخوانی حلونو کې بڼه ولري. بسته د شیشلو په بوتلونو کې وساتئ او که چیرې یو څه جوړ شوی وي بې برخې کړئ.

د TBE د کاري حل چمتو کول

د اراروز جیل الیکٹروفوریسس لپاره، د TBE یو بفر د 0.5x متمرکز کولو کې کارول کیدی شي) د تمرکز شویو ذخیرې کموالي (1:10. د ذخیره شوي حل حل په 10x کی د پیاوړی اوبو په وسیله. د وروستیو حل تمرکز 45 ملیونه Tris-Borate او 1mm EDTA دی. دا بفر اوس د اراروز جیل په چلولو کې چمتو دی.

څه ته اړتیا لرې

د TBE بفر جوړولو لپاره، تاسو به یواځې څلور مادی ته اړتیا ولرئ. په دې لیست کې پاتې توکي وسایل دي. څلور اړین توکي اړین دي د EDTA ډډډیم نمک، Tris بیس، بورک اسید او منین شوی اوبه.

لکه څنګه چې مناسبه وي تاسو به د تجهیزاتو لپاره، تاسو د pH متره او د تعقیب معیارونو ته اړتیا ولرئ. برسېره پردې، تاسو به 600 ملیونه متره او 1500 ملیارډ بکاکر یا فلاسس ته اړتیا ولرئ. ستاسو د تجهیزاتو اړتیاوو راټولول سلنډر فارغ شوي او بارونه یې ډک کړل او د تختو ډکول یې پیل کړل.

په لابراتوار کې د انټرنېټ وګورئ چې تاسو یې کارولو لپاره کارول کیږئ د دې لپاره چې تاسو پیل کړئ مخکې له دې چې تاسو اړتیا لرئ هر څه لرئ. د حل لپاره چمتو کولو په منځ کې هیڅ څه نه بد دي ځکه چې تاسو د مناسبې موادو څخه کار اخیستی.

که ستاسو لابراتوار په ښوونځي یا ستاسو کارځای کې وي، د مناسبو کارکوونکو سره وګوري ترڅو وګورئ چې دوی د ذخیرې ټول توکي لري. دا کار کولی شي په پای کې ستاسو وخت او انرژي وژغوري.